灰葡萄孢的分離方法
1、材料與方法
1.1實(shí)驗(yàn)儀器
凈化工作臺(tái), 恒溫培養(yǎng)箱, 顯微攝影儀等。
1.2生理試驗(yàn)培養(yǎng)基
( 1) 巨噬細(xì)胞炎性蛋白2Elisa試劑盒無(wú)碳源基礎(chǔ)培養(yǎng)基: NaNO 3 3g ; KH 2 PO 4 1g; KCl0. 5g ; MgSO 4 ?7H 2 O0. 5g ;FeSO 4 ?7H 2 O 0. 1 g; MnCl 2 ?4H 2 O 0. 08 g; 去離子水 1 L; 瓊脂 20 g; HCl 調(diào)節(jié)到 pH4。
( 2) 無(wú)氮源基礎(chǔ)培養(yǎng)基: 培養(yǎng)基( 1) 中的 3 g NaNO 3 改用 20 g 葡萄糖。
( 3) BC 培養(yǎng)基: 麥芽汁瓊脂與馬鈴薯汁葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基等量混合。
( 4) 馬鈴薯汁葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基( PDA) : 按常法制備。
以上培養(yǎng)基均在 121殺菌 20 min。
1.3生理試驗(yàn)培養(yǎng)方法
在無(wú)碳源基礎(chǔ)培養(yǎng)基中分別加入各種碳源, 或在無(wú)氮源基礎(chǔ)培養(yǎng)基加入各種氮源的平皿中, 在溫度( 20- 2) 培養(yǎng) 10 d, 每天觀察菌體的生長(zhǎng)狀態(tài)。
1-4 形態(tài)觀察方法在不同培養(yǎng)基的培養(yǎng)過(guò)程中, 觀察菌體發(fā)育狀況, 巨噬細(xì)胞炎性蛋白2Elisa試劑盒并用顯微攝影儀拍攝菌體形態(tài)。
2、結(jié)果與討論
2.1灰葡萄孢生理特征
2.1.1碳源利用
實(shí)驗(yàn)對(duì)象為 3 株灰葡萄孢, 編號(hào)分別為 BC1、 BC2 和 BC3, 將 3 株灰葡萄孢分別培養(yǎng)在加入不同碳源的無(wú)碳基礎(chǔ)培養(yǎng)基( 1) 的平皿上, 結(jié)果發(fā)現(xiàn) 3 株菌具有不同的生理特征。其中菌株 BC2 能夠利用的碳源種類較多, 巨噬細(xì)胞炎性蛋白2Elisa試劑盒在同樣培養(yǎng)條件下的生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)也很明顯。BC2除了不能同化 D- 甘露糖之外, 對(duì)表 2 中所列出碳源都能在不同的程度上加以利用。這 3 株灰葡萄孢都能很好地利用葡萄糖、 果酸、 酒石酸、 檸檬酸和蘋果酸。對(duì)于它們來(lái)說(shuō), 這幾種碳源的優(yōu)劣次序?yàn)榫剖?gt; 蘋果酸> 檸檬酸> 葡萄糖> 果糖。這種優(yōu)先利用有機(jī)酸的情況是灰葡萄孢的重要特征。這 3 株菌均不能利用甘露糖, 對(duì)于淀粉和其他它糖類的利用能力也很差。
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