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產(chǎn)品展示   ProductsATCC細(xì)胞>>轉(zhuǎn)化細(xì)胞>>赤狐皮膚成纖維樣細(xì)胞;RF-88S
 
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產(chǎn)品名稱:
赤狐皮膚成纖維樣細(xì)胞;RF-88S
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赤狐皮膚成纖維樣細(xì)胞;RF-88S相關(guān)產(chǎn)品:磷酸組胺說明書
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  赤狐皮膚成纖維樣細(xì)胞;RF-88S的詳細(xì)資料:

公司細(xì)胞廣泛用于國內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:

產(chǎn)品名稱

生長特性

貨號

赤狐皮膚成纖維樣細(xì)胞;RF-88S

貼壁生長

EY-X63784

細(xì)胞名稱  赤狐皮膚成纖維樣細(xì)胞;RF-88S
形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 該細(xì)胞系來源于一雌性赤狐的皮膚組織。1988年由中國科學(xué)院昆明細(xì)胞庫建立。赤狐具有B染色體。

培養(yǎng)條件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS

傳代方法: 1:2傳代;3-4天一次

傳代情況: P4

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測: 熒光法(-)
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
水通道蛋白6檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-Swissalbino形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣Aquaporin 6

絲氨;蘇氨蛋白磷酶檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T6-Swissalbino形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣serine;threonine protein kinase

絲裂原活化蛋白激酶3檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠骨髓瘤細(xì)胞;P3/NSI/1-Ag4-1[NS-1]形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣mitogen activited protein kinase 3

斯鈣素1檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠單核巨噬細(xì)胞;J774A.1形態(tài)特性: 單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞樣Stanniocalcin 1

斯鈣素2檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠骨髓瘤細(xì)胞;P3X63-Ag8.653形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Stanniocalcin 2

死亡受體3檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠結(jié)締組織細(xì)胞胸苷激酶缺陷株;L-M(TK-)形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣Death receptor 3

松弛素H2檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 豚鼠胚胎細(xì)胞;104C1形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣Relaxin H2

性成纖維細(xì)胞生長因子1檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 犬腎細(xì)胞;MDCK(NBL-2)形態(tài)特性: 上皮樣;多角acidic fibroblast growth factor 1

髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 貓腎細(xì)胞;CRFK形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣Triggering Receptor Expresses on Myeloid Cells-1

髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-2檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人肺癌細(xì)胞;H1299形態(tài)特性: 上皮樣細(xì)胞Triggering Receptor Expresses on Myeloid Cells-2

縮醛酶A檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞;C6形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣Aldolase isozyme A

胎兒纖維連接蛋白檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人淋巴瘤細(xì)胞;Romas形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣fetal fibronectin

胎盤蛋白13檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞;Jurkat,CloneE6-1形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣placental protein 13

胎盤蛋白14檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠T淋巴細(xì)胞;CTLL-2[CTLL2]形態(tài)特性: placental protein 14;Glycodelin-A

胎盤亮氨氨肽酶檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞;J-111形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Placental leucine aminopeptidase

碳酐酶Ⅵ檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人喉癌上皮細(xì)胞;Hep-2形態(tài)特性: 上皮樣carbonic anhydrase Ⅵ

糖磺基轉(zhuǎn)移酶10檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人肺細(xì)胞;HLF-a形態(tài)特性: 上皮樣細(xì)胞Carbohydrate sulfotransferase 10
赤狐皮膚成纖維樣細(xì)胞;RF-88S改良EC(MEC+n)肉湯規(guī)格:新生霉素用途:4.5mg每支含量

NBB 培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于啤酒中厭氧菌檢測

Littman 瓊脂規(guī)格:250g用途:用于真菌的分離培養(yǎng)

真菌培養(yǎng)基規(guī)格:BR250g詳情介紹

MUG)4-甲基傘形葡糖苷培養(yǎng)基規(guī)格:100g用途:用于藥品和生物制品中大腸埃希氏菌的檢測

腸球菌瓊脂(膽鹽-七葉苷-疊氮鈉瓊脂)規(guī)格:250g用途:用于腸球菌和腸道致病菌的分離培養(yǎng)
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的  *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

 

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 赤狐皮膚成纖維樣細(xì)胞 RF-88S
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