商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | NCI-H82人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 | 鑒定 | STR鑒定正確 |
貨號 | E-XB6556 | 種屬 | 人 |
生長特性 | 懸浮細(xì)胞 | 細(xì)胞形態(tài) | 上皮樣，懸浮成團(tuán) |
商品詳情：
生長特性 懸浮細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 上皮樣，懸浮成團(tuán)
凍存條件
凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度：液氮
培養(yǎng)方案A（默認(rèn)）
生長培養(yǎng)基:
RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S
培養(yǎng)條件:
氣相：空氣，95%；CO2，5%, 溫度：37℃
推薦傳代比例 1:2-1:4
推薦換液頻率 2-3次/周
參考資料(來源文獻(xiàn))
背景描述 原始腫瘤的形態(tài)學(xué)不符合小細(xì)胞肺癌（SCLC）的特征。該細(xì)胞系在生化和形態(tài)學(xué)上是SCLC的變種，表達(dá)神經(jīng)元特異性烯醇酶和肌酸激酶的腦同工酶。它的L-DOPA脫羧酶或蛙皮素的表達(dá)量未達(dá)到可檢測水平。該細(xì)胞產(chǎn)生一個(gè)異常大小的p53 mRNA（3.7 kb）。該細(xì)胞的C-myc DNA序列擴(kuò)增約25倍，c-myc RNA比正常細(xì)胞增加24倍。據(jù)報(bào)道該細(xì)胞表達(dá)功能性ANP受體，但用ANP處理不會(huì)改變其生長方式。該細(xì)胞的神經(jīng)絲和波形蛋白染色呈陽性，表達(dá)v-fes，v-fms，Ha-ras，Ki-ras，N-ras和c-raf 1 mRNA。
年齡（性別） 男性；41歲
組織來源 肺
細(xì)胞類型 腫瘤細(xì)胞
腫瘤類型 肺癌細(xì)胞
生物安全等級 BSL-1
倍增時(shí)間 24 hours (PubMed=25984343); ~25 hours (CLS); ~30 hours (DSMZ).
致瘤性 Yes; Yes, in nude mice
保藏機(jī)構(gòu) ATCC; HTB-175 CLS; 300442 DSMZ; ACC-556 KCLB; 30175 NCI-DTP; NCI-H82
細(xì)胞系培養(yǎng)步驟：
細(xì)胞系培養(yǎng)?的步驟主要包括細(xì)胞復(fù)蘇、細(xì)胞傳代和細(xì)胞凍存。
細(xì)胞復(fù)蘇?：
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。
將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37℃預(yù)熱的DMEM培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
細(xì)胞傳代?：
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DME培養(yǎng)基終止消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
?細(xì)胞凍存?：
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入DMEM培養(yǎng)基終止消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
這些步驟確保了細(xì)胞的生長和繁殖能夠在體外環(huán)境中得到有效的維持和擴(kuò)展，為科學(xué)研究提供了大量的細(xì)胞樣本?。
?細(xì)胞系培養(yǎng)?的步驟主要包括細(xì)胞復(fù)蘇、細(xì)胞傳代和細(xì)胞凍存。
細(xì)胞復(fù)蘇?：
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。
將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37℃預(yù)熱的DMEM培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
細(xì)胞傳代?：
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DMEM培養(yǎng)基終止消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
細(xì)胞凍存?：
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入DMEM培養(yǎng)基終止消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
這些步驟確保了細(xì)胞的生長和繁殖能夠在體外環(huán)境中得到有效的維持和擴(kuò)展，為科學(xué)研究提供了大量的細(xì)胞樣本
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細(xì)胞接收后的處理：
1）NCI-H82人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞收到細(xì)胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2）請?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)
3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。
4）備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1） 準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠多巴胺神經(jīng)元細(xì)胞 | 兔zi宮微血管內(nèi)皮細(xì)胞 |
小鼠骨髓單核細(xì)胞 | 人乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞 |
小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞 | 兔心肌成纖維細(xì)胞 |
小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞 | 小鼠三叉神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞 |
小鼠脾淋巴細(xì)胞 | HPASMC 人肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 |
小鼠骨髓巨噬細(xì)胞 | 小鼠骨膜干細(xì)胞 |
小鼠脊髓微血管內(nèi)皮細(xì)胞 | 兔腎上腺髓質(zhì)細(xì)胞 |
小鼠腦血管成纖維細(xì)胞 | 大鼠頸動(dòng)脈成纖維細(xì)胞 |
小鼠DRG神經(jīng)元細(xì)胞 | 小鼠脂肪細(xì)胞 |
小鼠腦血管周細(xì)胞 | 豬睪丸間質(zhì)細(xì)胞 |
小鼠腦膜細(xì)胞 | 小鼠椎體終板軟骨細(xì)胞 |
小鼠腦皮層神經(jīng)元細(xì)胞 | 兔小腸平滑肌細(xì)胞 |
小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞 | 大鼠胰島β細(xì)胞 |
小鼠脊髓神經(jīng)元細(xì)胞 | 牛睪丸支持細(xì)胞 |
小鼠雪旺細(xì)胞 | 兔胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞 |
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