SW620人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞
細(xì)胞別稱：SW-620; SW 620; SW.620；人腸癌細(xì)胞
種屬來(lái)源：人
年齡性別：男；51歲
組織來(lái)源：結(jié)直腸腺癌，來(lái)自轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)
生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
背景簡(jiǎn)介：SW480源自一位51歲白人男性患者的原位直腸腺癌，而SW620源自同一病人一年后的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶。該細(xì)胞CSAp和直腸抗原3陰性；角蛋白陽(yáng)性；p53基因第273位密碼子的G→A突變引起Arg→His替代，309位密碼子的C→T突變導(dǎo)致Pro→Ser替代；細(xì)胞p53蛋白表達(dá)水平升高；癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis和fos的表達(dá)呈陽(yáng)性；未檢測(cè)到癌基因N-myc的表達(dá)；不表達(dá)Matrilysin（一種與腫瘤侵襲相關(guān)的金屬蛋白酶）。有報(bào)道稱該細(xì)胞表達(dá)GM-CSF。ras原癌基
生物安全等級(jí)：1
細(xì)胞規(guī)格：1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測(cè)：無(wú)
基因表達(dá)情況：Carcinoembryonic antigen (CEA) 0.15 ng/10^6 cells/10 days; transforming growth factor alpha; matrilysin. The cells are negative for expression of CSAp (CSAp-) and colon antigen 3, negative. The cells are positive for keratin by immunoperoxidase staining. The line is positive for expression of c-myc, K-ras, H-ras, N-ras, Myb, sis and fos oncogenes.
保藏機(jī)構(gòu)：ATCC; CCL-227 ECACC; 87051203 ；中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所細(xì)胞資源中心
培養(yǎng)基：90%L15+10% FBS+PS
培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
凍存條件：無(wú)血清凍存液，液氮儲(chǔ)存
倍增時(shí)間：~20-26 hours
STR鑒定位點(diǎn)Amelogenin：X；CSF1PO：13，14；D13S317：12；D16S539：9，13；D18S51：13；D19S433：13；D21S11：30，30.2；D2S1338：24；D3S1358：15，16；D5S818：13；D7S820：8，9；D8S1179：13；FGA：24；TH01：8；TPOX：11；vWA：16；
英文名稱 | SW620 | 規(guī)格 | 1×106cells |
種屬 | 人 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁生長(zhǎng) |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 | 貨號(hào) | E-XB6198 |
用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) | 貨期 | 現(xiàn)貨 |
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，干冰運(yùn)輸?shù)募?xì)胞檢查干冰是否*揮發(fā)，細(xì)胞是否解凍，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。.觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置2-4h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后次傳代建議1：2傳代 。
9. 注意： 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。
1)復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10 cm皿中，加入約8 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02% EDTA)于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤(rùn)所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min(視細(xì)胞情況而定)，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml*培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
3)細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
大鼠嗅球神經(jīng)元細(xì)胞 | 人乳腺癌細(xì)胞AU565(STR鑒定正確) |
人腮腺細(xì)胞 | 人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞Hs 683(STR鑒定正確 |
人宮頸成纖維細(xì)胞 | 小鼠黑色素瘤細(xì)胞B16-F1（種屬鑒定） |
人宮頸平滑肌細(xì)胞 | 人成骨肉瘤細(xì)胞MG-63(STR鑒定正確) |
人卵巢間質(zhì)細(xì)胞 | 小鼠胰腺腺泡癌細(xì)胞266-6 |
人輸卵管上皮細(xì)胞 | 人肝永生化細(xì)胞THLE-2(STR鑒定正確) |
人輸卵管平滑肌細(xì)胞 | 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞LS 180(STR鑒定正確) |
人輸精管平滑肌細(xì)胞 | 人成骨肉瘤細(xì)胞Saos-2(STR鑒定正確) |
人附睪平滑肌細(xì)胞 | 人絨毛膜癌細(xì)胞JEG-3(STR鑒定正確) |
人乳腺上皮細(xì)胞 | 人咽頭癌胸水轉(zhuǎn)移細(xì)胞Detroit 562(STR鑒定正確) |
人乳腺成纖維細(xì)胞 | AAV-293 (人胚腎細(xì)胞) (STR鑒定正確) |
人乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞 | CaES-17 (人食管癌細(xì)胞) |
人乳腺癌（腫瘤）細(xì)胞 | SW620人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞GNM (人口腔鱗癌頸淋ba結(jié)轉(zhuǎn)移癌細(xì)胞) |
人子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞 | HL-7702 [L-02; LO2] (人正常肝細(xì)胞) (Hela污染細(xì)胞系，暫不供應(yīng)) |
人子宮瘤細(xì)胞 | KLE (人zi宮內(nèi)膜癌細(xì)胞) (STR鑒定正確) |
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