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產(chǎn)品展示   ProductsATCC細(xì)胞>>轉(zhuǎn)化細(xì)胞>>大耳山羊皮膚細(xì)胞;LDG-3
 
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產(chǎn)品名稱:
大耳山羊皮膚細(xì)胞;LDG-3
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產(chǎn)品特點(diǎn):
大耳山羊皮膚細(xì)胞;LDG-3相關(guān)產(chǎn)品:禾谷鐮刀菌PCR試劑盒步驟
豬螺桿菌PCR試劑盒步驟
莢膜組織胞漿菌馬皮疽變種PCR試劑盒費(fèi)用
莢膜組織胞漿菌PCR試劑盒說明書
  大耳山羊皮膚細(xì)胞;LDG-3的詳細(xì)資料:

公司細(xì)胞廣泛用于國內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:

產(chǎn)品名稱

生長特性

貨號

大耳山羊皮膚細(xì)胞;LDG-3

貼壁生長

EY-X63766

細(xì)胞名稱  大耳山羊皮膚細(xì)胞;LDG-3
形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 該細(xì)胞系來源于一雄性大耳山羊的皮膚組織。1990年由中國科學(xué)院昆明細(xì)胞庫建立。

培養(yǎng)條件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS

傳代方法: 1:2;3-4天一次

傳代情況: P5

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測: 熒光法(-)
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
β2糖蛋白檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人胚皮膚成纖維細(xì)胞;CCC-ESF-1形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣β2-Glycoprotein

β2糖蛋白1抗體IgA;G;M檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HT-29形態(tài)特性: 上皮樣β2-glycoprotein 1 antibody IgA;G;M

β2整合素檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人巨細(xì)胞白血病細(xì)胞株;Mo7e形態(tài)特性: 圓形integrin β2

β檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞;NCI-H157形態(tài)特性: 多角β-amylase

β痕跡蛋白檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞;P815形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣β-trace protein

γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CHO形態(tài)特性: 上皮樣interferon-inducible protein 16

阿爾茨海默病相關(guān)神經(jīng)絲蛋白檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 昆蟲卵巢細(xì)胞;SF9形態(tài)特性: 圓形AD7c-NTP

癌基因蛋白質(zhì)p190;bcr-abl檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人前列腺癌細(xì)胞;PC-3[PC3]形態(tài)特性: 上皮樣p190;bcr-abl

癌癥促凝素檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人紅系白血病細(xì)胞;TF-1形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Cancer Procoagulant

氨基甲酰磷合成酶2檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人導(dǎo)管瘤細(xì)胞;UACC812形態(tài)特性: 上皮樣carbamyl phosphate synthetase-2

八聚體結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子4檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人絨癌細(xì)胞;JEG-3形態(tài)特性: 上皮樣Octamer Binding Transcription Factor 4

白介素12受體β2檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人類原巨核細(xì)胞型白血病細(xì)胞;UT-7形態(tài)特性: 圓形Interleukin 12 receptorβ2

白介素17受體檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T6-Swissalbino形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣Interleukin 17 Receptor

白介素18受體檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 白介素-2轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞;JEG-3/VP16-IL-2形態(tài)特性: 上皮樣;多角Interleukin 18 Receptor

白介素1β轉(zhuǎn)換酶檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人APP-PS1(C410Y)雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株;7WCY1.0形態(tài)特性: 多角Interleukin 1β converting enzyme

白介素1家族成員10檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞;Jurkat,CloneE6-1形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Interleukin-1 family member 10

白介素1可溶性受體Ⅱ檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人APP-PS1(M146L)雙基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株;7WML6.0形態(tài)特性: 多角IL-1sRⅡ
大耳山羊皮膚細(xì)胞;LDG-3厭氧菌液體培養(yǎng)基規(guī)格:250g拉丁屬名:Anaerobic Liquid Medium

仔豬副傷寒培養(yǎng)基規(guī)格:1萬毫升用途:用于仔豬副傷寒疫苗

維生素C(抗壞血)規(guī)格:10g詳情介紹

SSDC培養(yǎng)基(ISO)規(guī)格:250g用途:用于小腸結(jié)腸耶爾森氏菌的分離培養(yǎng)

支原體半流體培養(yǎng)基基礎(chǔ)規(guī)格:1000ml詳情介紹

無鹽胰胨水規(guī)格:20支用途:用于副溶血性弧菌生化鑒定
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的  *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

 

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 大耳山羊皮膚細(xì)胞 LDG-3
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021-69985169
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