公司細(xì)胞廣泛用于國(guó)內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究，作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹：
產(chǎn)品名稱 | 生長(zhǎng)特性 | 貨號(hào) |
胚胎肺成纖維細(xì)胞；WI-38 | 貼壁生長(zhǎng) | EY-X63905 |
細(xì)胞名稱 胚胎肺成纖維細(xì)胞；WI-38
形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞
生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)
特征特性: WI-38系來(lái)自妊娠3個(gè)月的正常胚胎肺組織。該細(xì)胞系是首株用于人類疫苗制備的系。培液中添加TNFalpha可以促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。
培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%
傳代方法: 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
傳代情況: P(15+5)
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè): 陰性
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
叉頭框蛋白N3檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: Cas9穩(wěn)
硝基-L-氨酸MST4 Antibody4,二甲基環(huán)己酮,98%
N-酰-DL-氨酸Phospho-APP (Thr668) Antibody6-
N-酰-DL-AMPA Receptor 4 (GluA 4) (Ala60) Antibody羥基金剛烷
DL-α-氨基己二酸,2-氨基己二酸AMPA Receptor 4 (GluA 4) (Arg860) Antibody5-甲基-羥基吡啶
DL-半鹽酸鹽，一水TORC2/CRTC2 Antibody2-氨基-5-溴-6-甲基吡啶
DL-鹽酸鹽Phospho-PKM2 (Tyr105) Antibody2,5-噻吩二羧酸
DL-Forskolin溴-甲酸
DL-FAAH1 (C84F1) Rabbit mAb6-溴正己
DL-鹽酸鹽GPNMB (E4D7P) XP® Rabbit mAb溴-甲
DL-高氨酸Phospho-PLD1 (Thr147) Antibody2-氨基-甲氧基甲酸
DL-高PLD1 Antibody2,二氫-1H-喹啉-酮
克里唑啼尼鹽酸;克里唑替尼鹽酸eIF6 (D16E9) XP® Rabbit mAb2-炔噻吩
DL-賴氨酸鹽酸鹽eIF6 (D16E9) XP® Rabbit mAb炔基溴化鎂
DL-正Phospho-PLD1 (Ser561) Antibody溴-1,1,1-三氟酮
DL-正GABA(B)R1 Antibody三(溴)
DL-焦EAAT2 Antibody4,6-二-5-硝基嘧啶
DL-叔GABA(B)R2 AntibodyN-甲基高哌
N-酰-DL-SNF2H (D4W6N) Rabbit mAbBROMO-2-METHOXYBENZALDEHYDE
DL-高半DFCP1 (E9Q1S) Rabbit mAbN-氨基嗎啉
間氟-DL-Phospho-LIMK1 (Thr508)/LIMK2 (Thr505) Antibody溴代環(huán)烷
鈣蛋白酶抑制劑I(進(jìn)口)Phospho-LIMK1 (Thr508)/LIMK2 (Thr505) Antibody氧羰基酸
DL-氨酰-DL-氨酸Phospho-LIMK1 (Thr508)/LIMK2 (Thr505) Antibody氟-5-溴酚
DL-氨酰-DL-正LIMK1 Antibody2-丁炔酸酯
D-溴氨酸NKCC2 Antibody5-羥基
L-2,二氨基丁酸鹽Phospho-AP2M1 (Thr156) Antibody喹啉甲
(1-萘基)-L-氨酸Smad4 (D3M6U) Rabbit mAb2-甲基吡啶
Fmoc-(2-萘基）-D-氨酸Smad4 (D3M6U) Rabbit mAb2,6-二氟甲
D-（2-吡啶基）-氨酸LIMK2 (8C11) Rabbit mAb(氨基基)啉-酮
（吡啶基）-L-氨酸LIMK2 (8C11) Rabbit mAb(R)-1-N-BOC-哌甲酸甲酯
（吡啶基）-D-氨酸Senescence Associad Secretory Phenotype (SASP) Antibody Sampler Kit2-基
FMOC-D-（吡啶基）-氨酸S5a/PSMD4 Antibody2-氨基-6-甲酸
L-瓜氨酸E2-25K/Hip2 Antibody2,二甲氧基芐
Fmoc-L-瓜氨酸UBE2L3 Antibody芐氧基甲
Boc-L-β-高氨酸CD3 (17A2) Rat mAb (violetFluor™ 450 Conjuga)氨基芐
Boc-L-beta-5-芐酯MMP-9 Antibody呋喃甲
Fmoc-L-β-5-叔丁基酯COX IV (D6I4K) Rabbit mAb (Rodent Specific)2-并咪唑
癌細(xì)胞；HCT116-Cas9-568形態(tài)特性: 上皮樣；多角RTN4B
胚胎肺成纖維細(xì)胞；WI-38知母皂苷BII136656-07-0中文別名：知母皂苷B2
英文名：Timosaponin BII
CAS登錄號(hào)：136656-07-0
分子式：C45H76O19
分子量：920.50
分子結(jié)構(gòu)：
規(guī)格：20mg/支
純度：≥ 98%
用途：用于含量測(cè)定/鑒定/藥理實(shí)驗(yàn)等。
提取來(lái)源：?jiǎn)巫尤~植物百合科 Liliaceae 知母 Anemarrhena asphodeloides Bge. 的干燥根莖
藥理藥效：具有增強(qiáng)學(xué)習(xí)記憶，改善腦功能，防治癡呆的藥理作用。
貯存條件： 4℃冷藏、密封、避光
有效期： 2年
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液，用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過(guò)細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái)，吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000～2000g 離心 1min，沉淀細(xì)胞，盡量去除細(xì)胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
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