公司細(xì)胞廣泛用于國(guó)內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究，作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹：
產(chǎn)品名稱 | 生長(zhǎng)特性 | 貨號(hào) |
肺癌細(xì)胞；TKB-1 | 貼壁生長(zhǎng) | EY-X63467 |
細(xì)胞名稱 肺癌細(xì)胞；TKB-1
形態(tài)特性: 上皮樣
生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)
特征特性:
培養(yǎng)條件:
傳代方法:
傳代情況: P13
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè): 培養(yǎng)法（-）
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將*成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% *和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
rmSpinesin, CF (10 UG)
三酚Phospho-STING (Ser366) (D8K6H) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)
1-萘酚PIAS3 Antibody硝基二酸二酯
鄰酚TRAF5 (D3E2R) Rabbit mAbDL-高半*硫內(nèi)酯鹽酸鹽
對(duì)酚Pim-3 (D17C9) Rabbit mAb(S)-縮水甘油
對(duì)二酚Pim-3 (D17C9) Rabbit mAb1,2,3,4,6-beta-D-葡萄糖五酸酯
愈創(chuàng)木酚p38 MAPK (D13E1) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)*
萘酚ASEAAT1 Antibody2,6-二硝
α-萘酚醌烷GGA3 Antibody2,6-二硝基
2-（5-溴-2-吡啶偶氮）-5-（二氨基）酚Phospho-TrkA (Tyr785)/TrkB (Tyr816) (C67C8) Rabbit mAbbeta-煙酰腺嘌呤二核苷二鈉
蒽酮(AR)Phospho-TrkA (Tyr785)/TrkB (Tyr816) (C67C8) Rabbit mAb2--氟
硫代米氏酮TFIIB (2F6A3H4) Mouse mAb2-基酰酸酯
茚三酮，一水CHD2 Antibody5-甲氧基色
菲尼酮Phospho-MKK7 (Ser271/Thr275) Antibody溴-1--2-氟
單酸阿糖腺苷;阿糖腺苷單酸PD-L1 (Extracellular Domain Specific) (D8T4X) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)3,二氟硫酚
α-萘黃酮MKK7 Antibody2,6-二羥
紫脲酸銨FXR1 Antibody2,二
1-萘TPA (12-O-tradecanoylphorbol-1Aceta)2,6-二溴酚
對(duì)二Phospho-p38 MAPK (Thr180/Tyr182) (3D7) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)1-甲基-1,2,三唑
聯(lián)Phospho-β-Canin (Ser675) (D2F1) XP® Rabbit mAbL-(+)-二甲酯
對(duì)Phospho-β-Canin (Ser675) (D2F1) XP® Rabbit mAb甲基二酸二酯
鄰聯(lián)甲R(shí)YBP (D8J7W) Rabbit mAb2-溴代異戊酸酯
鹽酸羥AMPKβ1 (71C10) Rabbit mAb甲酸正己酯
3,3'-二甲基聯(lián)萘AMPKβ1 (71C10) Rabbit mAb鹽酸奎寧
N-基-2-萘α-Synuclein (D37A6) XP® Rabbit mAb2,二磺酰
金Oα-Synuclein (D37A6) XP® Rabbit mAb2-硝基
2,二巰基磺酸鈉Atg12 (D88H11) Rabbit mAb間三酚
硫酸鈰銨Atg12 (D88H11) Rabbit mAb硝基鄰二甲酸
鹽酸鄰聯(lián)甲NAC1 Antibody (Rodent Preferred)2,5-二溴甲酸
偏釩酸銨Phospho-AMPKα1 (Ser485) Antibody-2-氟甲基酯
1-萘鹽酸鹽Phospho-AMPKα1 (Ser485)/AMPKα2 (Ser491) Antibody2,3,三氟甲酸
鄰二Phospho-AMPKβ1 (Ser182) Antibody鹽酸*
6-異硫酸熒光素AMPKγ1 Antibody2,5-二羥基對(duì)二甲酸
2,二AMPKγ1 Antibody2-甲酸甲酯
硫代酰Phospho-AMPKα (Thr172) (D79.5E) Rabbit mAb2'-羥基酮
磺基羅丹明101Phospho-AMPKα (Thr172) (D79.5E) Rabbit mAb2,二溴甲酸
N-基-1-萘Acetyl-CoA Carboxylase 1 Antibody鄰芐
細(xì)胞；NCI-H661 RPMI1640(w/oHepes)優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%
肺癌細(xì)胞；TKB-1人鳥(niǎo)苷解離抑制因子(GDI)ELISA試劑盒M-CSFELISAkit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
人羥賴氨(Hyl)ELISA試劑盒M-CSFELISAkit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
人粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA試劑盒M-CSFRELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
人補(bǔ)體1q(C1q)ELISA試劑盒MCTELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
人神經(jīng)生長(zhǎng)導(dǎo)向因子Slit2ELISA試劑盒MCVELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
人可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)ELISA試劑盒MDAELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
人*(AP)ELISA試劑盒MDAELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
人間隙連接蛋白(Cx)ELISA試劑盒MDAELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液，用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過(guò)細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái)，吸除*細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用*細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000～2000g 離心 1min，沉淀細(xì)胞，盡量去除*細(xì)胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
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